動物細胞培養的特點與難點_動物細胞培養的條件?
特邀律師
與其他培養相比,動物細胞培養存在一些特殊的地方:
1、培養環境純凈度要求高,動物細胞培養使用超純水,培養基添加物需要細胞培養級,細胞往往對培養環境比較敏感,過多的雜質會對細胞的代謝產生影響,動物細胞培養往往需要添加血清等營養物質,目前也有很多無血清培養基可以支持細胞的生長和增殖;
2、動物細胞一般是貼壁依賴型生長的,通過馴化可以實現懸浮培養,原代培養的細胞往往是一個不同種類細胞的混合物,通過純培養得到單一的細胞群,細胞大部分是有限傳代的,少量細胞株可以實現轉化,無限傳代,甚至癌化,所以要避免與人體的接觸;
3、動物細胞的擴大培養,因為動物細胞沒有細胞壁,對剪切力和滲透壓比較敏感,動物細胞的生物反應器,要注意攪拌溫和,pH調節時注意體系的滲透壓變化。
傳代培養是組織培養常規保種方法之一。也是幾乎所有細胞生物學實驗的基礎。當細胞在培養瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶,細胞才能繼續生長。這一過程就叫傳代。 原代培養是將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。 細胞系(Cell Line):原代培養舞經首次傳代成功即成細胞系,由原先存在于原代培養物中的細胞世系對于人類腫瘤細胞,在體外培養半年以上,生長穩定,并連續傳代的即可稱為連續性株或系。
動物細胞培養需要滿足以下條件:
①無菌、無毒的環境:培養液應進行無菌處理.通常還要在培養液中添加一定量的抗生素,以防培養過程中的污染.此外,應定期更換培養液,防止代謝產物積累對細胞自身造成危害.
②營養:合成培養基成分:糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等.通常需加入血清、血漿等天然成分.
③溫度:適宜溫度:哺乳動物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4.
④氣體環境:95%空氣+5%CO2.O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH.
解答: 解:動物細胞培養必需條件的是:無菌、無毒的環境;營養;適宜的溫度和pH;氣體環境.動物細胞培養不需要光照條件.
培養基不同:植物細胞(固體培養基),動物細胞(液體培養基) 培養基的成分不同:動物細胞培養必須利用動物血清,植物組織培養則不需要。
原理不同:植物組織培養的原理為植物細胞的全能性,動物細胞培養的原理為細胞的增殖。選A:動物細胞培養最主要的是必須要有動物血清,植物細胞培養則要的是真我激素。
而B中的傳代培養主要指的是10到40或50代,這不是它們最重要的區別。C選項中植物細胞也可以大量培養,如大量繁殖無病毒植株。D選項來說,不管是動物細胞培養還是植物細胞培養都必須要無菌條件,否則會失敗的。A型和B型流感病毒都可以用雞胚培養,這里也包括H5N1。對于禽源性流感病毒來說,不管是分離敏感性和病毒增值效果來說,雞胚分離都優于細胞分離培養。雞胚分離培養的優點還有抗污染能力好,因為是胚體細胞,增值的病毒適合生產疫苗。但雞胚法也有缺點,對人源性流感病毒敏感性低于細胞分離,還有必競雞胚還是有免疫系統,在免疫系統的壓力下病毒容易發生變異。雞胚分離對種蛋要求也很高,一般需要使用SPF種蛋,種蛋供應不方便實驗室小規模使用。細胞培養分離好處有,細胞種子實驗室保存方便,分離人源性流感病毒敏感性好。病毒不容易產生變異,但細胞系屬于癌細胞,不能用于生產疫苗,而且在分離培養A型B型流感病毒的傳代過程中,從5代以有隨著傳代次數增加反而滴度下降的現象。所以說雞胚分離適合于廠家生產,細胞分離適合于實驗室。
原代培養離體時間短,遺傳性狀和體內細胞相似,適于做細胞形態、功能和分化等研究。一般動物和人的所有組織都可以用于培養,但幼體組織和細胞(如胚胎組織、幼仔的臟器等)更容易進行原代培養。
動物細胞培養與植物細胞培養的重要區別在于:培養基不同。動物細胞培養是液體培養基,其成分中有動物血清,另外,培養的動物細胞大都取自動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織。植物細胞培養可以取自植物體細胞。學科類問題都可以在101教育PPT里搜索到,非常好用。